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pRI 201-ON-GUS DNA

タカラバイオ㈱ / TAKARA BIO

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概要

pRI 201 DNAシリーズは、pRI 101シリーズ(製品コード 3262/326³⁾よりも更に形質転換植物における外来遺伝子の高発現を目的としたベクターである。カリフラワーモザイクウイルス(CaMV)の35Sプロモーターの下流にADH(Alcohol Dehydrogenase)遺伝子由来の5’非翻訳領域(5’-UTR)(翻訳エンハンサー領域)を搭載したpRI 101シリーズの骨格¹⁾に加え、従来のNOS(Nopaline Synthase)遺伝子由来terminatorをHSP(Heat Shock Protein)遺伝子由来terminatorに換えることにより、pRI 101シリーズに比べ植物体での目的遺伝子産物の高発現が期待できる²⁾。また、HSP terminatorの下流にあるクローニングサイト(MCS²⁾に他の遺伝子を含む発現カセット(プロモーター+エンハンサー+目的遺伝子+ターミネーター)を導入することにより、一つのベクターで複数の遺伝子を形質転換することが可能である。
pRI 201シリーズには、シロイヌナズナADH由来5’-UTR(AtADH 5’-UTR)を搭載したpRI 201-AN DNAとイネADH由来5’UTR(OsADH 5’-UTR)を搭載したpRI 201-ON DNAの2種類があり、双子葉植物にはpRI 201-AN DNAが、単子葉植物にはpRI 201-ON DNAが適している。また、形質転換時のポジティブコントロールとして汎用されるGUS(β-glucuronidase)遺伝子をそれぞれのベクターに組み込んだコントロールベクター(pRI 201-AN-GUS DNA、pRI 201-ON-GUS DNA)も用意している。
本製品は植物形質転換用バイナリーベクターpRI 910 DNA(製品コード326¹⁾をバックボーンとしたバイナリーベクターであり、Rhizobium rhizogenesのRiプラスミド由来の変異型複製起点(Ri ori)を持っている³⁾。さらにpUC系のプラスミドと同じ複製起点(ColE1 ori)を持つために、大腸菌で高コピー数のプラスミドとして維持され、また、クローニングサイトが植物の選択マーカーに対してT-DNAのRight Border(RB)側に配置されているため、目的遺伝子が欠失することなく安定に植物染色体に組込みが可能になる等、pRI 910 DNAの有する特徴も保持している。
※本ベクターは、国立大学法人奈良先端科学技術大学院大学より技術および試料の提供を受けて、タカラバイオ(株)が製品化いたしました。

特長

<内容>
pRI 201-AN DNA (製品コード 3264)  10 μg
(濃度 0.5 μg/μl)
<保存>
-20℃
<鎖長>
pRI 201-AN DNA 10,432 bp
pRI 201-ON DNA 10,475 bp
pRI 201-AN-GUS DNA 12,220 bp
pRI 201-ON-GUS DNA 12,263 bp
<純度>
1.Dideoxy 法によるシーケエンスの結果、クローニングサイトが保持されていることを確認している。
2.クローニングサイトにおいてのみ1 ヵ所切断する制限酵素について、その切断を確認している。
<用途>
バイナリーベクター法により、Rhizobium(Agrobacterium)を介して植物の形質転換を行うためのベクター。シロイヌナズナ、トマト、タバコなどの双子葉植物(pRI 201-AN DNA、pRI 201-AN-GUS DNAを使用)あるいはイネなどの単子葉植物(pRI 201-ON DNA、pRI 201-ON-GUS DNAを使用)の形質転換、および外来遺伝子の高発現を実現。
使用できる代表的なRhizobium(Agrobacterium)としてはRhizobium radiobactor (Agrobacterium tumefaciens) LBA4404があり、この菌株のエレクトロポレーション法用のコンピテントセルとしてAgrobacterium tumefaciens LBA4404 Electro-Cells(製品コード9115)がある。
更新日:2017-04-18

スペック表

Cat. No. 3267
Unit Size 10 μg
Size
保存温度 -20℃
輸送温度 -20℃
Price(JPY) 53,000

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