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In-Fusion SMARTer Directional cDNA Library Construction Kit

TAKARA BIO Inc. / Clontech Laboratories

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Overview

In-Fusion SMARTer Directional cDNA Library Construction Kitは、ClontechのSMARTer cDNA合成およびIn-Fusion PCRクローニングという2つのシステムを組み合わせたcDNAライブラリー構築キットである。
本キットを用いることで、面倒なcDNAの制限酵素処理や平滑化、アダプター付加は不要で、cDNA合成からクローニング、ライブラリーの構築増幅までを3日間で簡便に行うことができる。
total RNAから合成されたcDNAはデイレクショナルにベクターにクローニングされ、大腸菌へ形質転換後、寒天培地上に現れたコロニーの90%以上はインサートを含んでいる。
<SMARTer cDNA合成 >
○微量total RNA(最小必要量10 ng)からでも、品質の高い完全長cDNAライブラリーを合成できる。
○1チューブ、一回の酵素反応で完了。アダプターライゲーションやテール形成反応、精製ステップは不要。
<In-Fusionクローニング >
○連結したいベクターの末端15塩基とそれぞれ相補的な配列を付加したPCRプライマーで目的遺伝子を増幅しておくだけで*、簡便に高効率にクローニング。
○任意のプラスミドベクターの任意の部位にディレクショナルに挿入可能。
○余分な配列をいっさい付加しない
* 本キットには、クローニングベクター(pSMART2IFD Linearized Vector)および、そのベクター末端15塩基と相補的な配列を付加したPCRプライマー(5’ PCR Primer II A、3’ In-Fusion SMARTer PCR Primer)が含まれています。別途PCR酵素が必要です。
<用途>
○cDNA ライブラリー構築
○完全長cDNA取得
○cDNA増幅
○標的遺伝子単離、解析

Explanation

○わずか10 ngのtotal RNAからcDNAライブラリーを構築
○cDNA断片の制限酵素処理、平滑化、アダプター付加は不要
○SMARTer法により完全長cDNAを合成し、In-Fusion法により任意のベクターにディレクショナルにクローニング
<内容>
○SMARTer V Oligonucleotide
○3’In-Fusion SMARTer CDS Primer
○SMARTScribe Reverse Transcriptase
○5× First-Strand Buffer(RNase-Free)
○DTT
○dNTP mix
○RNase Inhibitor
○Control Total RNA
○5’PCR Primer II A
○3’In-Fusion SMARTer PCR Primer
○Sodium Acetate
○Glycogen
○Deionized H₂O
○1× Fractionation Column Buffer
○CHROMA SPIN+TE-1000 Columns
○5× In-Fusion HD Enzyme Premix*1
○pUC19 Control Vector, linearized*1
○2 kb Control Insert*1
○pSMART2IFD Linearized Vector
○Forward Screening Primer
○Reverse Screening Primer
○QuickClean Enzyme Removal Resin*2
*1 In-Fusion HD Cloning Kit(製品コード 639649)と同じものです。
*2 製品コード 631770と同じものです。
※ 本キットの使用には別途PCR酵素が必要です。ユーザーマニュアルではAdvantage 2 PCR Kit(製品コード 639207)を用いたプロトコールを紹介しています。
<保存>
CHROMA SPIN Columns、Deionized H₂O:室温
Control RNA、SMARTer V Oligonucleotide:-70℃
他の試薬:-20℃
Update:2017-04-18

Spec sheet

Cat. No. 634933
Unit Size 10回
Size
保存温度 室温, 4℃, -20℃, -70℃
輸送温度 室温, 4℃, -20℃, ドライアイスジカヅケ
Price(JPY) 250,300

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